免疫共沉淀（Co-IP）檢測(cè)以抗體和抗原之間的專(zhuān)一性作用為基礎(chǔ)，是用于研究蛋白質(zhì)相互作用的經(jīng)典方法。Co-IP檢測(cè)到兩種蛋白的結(jié)合，符合體內(nèi)實(shí)際情況，檢測(cè)結(jié)果可信度高，常用于驗(yàn)證兩種已知蛋白的相互作用，以及尋找與已知蛋白相互作用的未知蛋白。
實(shí)驗(yàn)原理：
抗體結(jié)合于瓊脂糖磁珠上的Protein A/G，當(dāng)抗體免疫沉淀抗原蛋白時(shí)，能與抗原蛋白結(jié)合的目的蛋白一并被沉淀下來(lái)，形成“目標(biāo)蛋白+抗原蛋白+抗體+Protein A/G”免疫復(fù)合物，經(jīng)免疫印跡或質(zhì)譜檢測(cè)目的蛋白。
普利萊擁有專(zhuān)業(yè)的技術(shù)服務(wù)團(tuán)隊(duì)，可以為客戶(hù)定制個(gè)性化的實(shí)驗(yàn)方案，積極促進(jìn)客戶(hù)的實(shí)驗(yàn)研究和產(chǎn)品開(kāi)發(fā)，為客戶(hù)提供優(yōu)質(zhì)的免疫共沉淀技術(shù)服務(wù)。專(zhuān)業(yè)的技術(shù)人員擁有豐富的行業(yè)經(jīng)驗(yàn)，幫助客戶(hù)優(yōu)化實(shí)驗(yàn)條件，嚴(yán)格監(jiān)管實(shí)驗(yàn)過(guò)程中的各個(gè)環(huán)節(jié)，保證服務(wù)質(zhì)量。
技術(shù)服務(wù)流程：
Co-IP的實(shí)驗(yàn)步驟：
1. 蛋白提?。簭募?xì)胞或組織中提取蛋白質(zhì)，可以使用細(xì)胞裂解緩沖液來(lái)破裂細(xì)胞膜，并添加蛋白酶抑制劑和磷酸酯酶抑制劑來(lái)保護(hù)蛋白質(zhì)的完整性；
2. 抗體固定：將目標(biāo)蛋白質(zhì)的抗體與磁珠或瓊脂糖小球等固相材料結(jié)合，形成抗體固定的材料；
3. 免疫沉淀：將細(xì)胞提取物與抗體固定的材料一起孵育，使目標(biāo)蛋白質(zhì)與其結(jié)合伙伴形成復(fù)合物；
4. 洗滌：將反應(yīng)混合物進(jìn)行多次洗滌，以去除非特異性結(jié)合的蛋白質(zhì)和雜質(zhì)；
5. 洗脫：通過(guò)改變pH、離子強(qiáng)度或添加競(jìng)爭(zhēng)劑等方式，將復(fù)合物從抗體固定材料上洗脫下來(lái)；
6. 蛋白質(zhì)分析：對(duì)洗脫的樣品進(jìn)行蛋白質(zhì)分析，可以使用SDS-PAGE和免疫印跡等技術(shù)檢測(cè)目標(biāo)蛋白質(zhì)及其結(jié)合蛋白的存在。
客戶(hù)提供樣本要求：
1. 動(dòng)物組織＞400mg/樣品；
2. 植物組織＞2g/樣品；
3. 細(xì)胞樣品：＞2×107細(xì)胞數(shù)/樣品；
4. 蛋白樣品：裂解樣品總蛋白量＞2ml/樣品。干冰運(yùn)輸；
5. 抗體：IP級(jí)別抗體和抗體信息，若因客戶(hù)抗體原因?qū)е聦?shí)驗(yàn)失敗，由此造成的損失由客戶(hù)承擔(dān)。
服務(wù)項(xiàng)目：
服務(wù)內(nèi)容 | 價(jià)格 | 周期 | 交付 |
IP | 3600/膜 | 1-2周 | 高分辨率的清晰圖片，準(zhǔn)確、客觀、可信的檢測(cè)數(shù)據(jù)和分析結(jié)果：western blot鑒定結(jié)果；完整實(shí)驗(yàn)報(bào)告(包括詳細(xì)實(shí)驗(yàn)步驟及免疫沉淀結(jié)果相關(guān)的圖表) |
Co-IP | 4500/膜 | 1-2周 | 高分辨率的清晰圖片，準(zhǔn)確、客觀、可信的檢測(cè)數(shù)據(jù)和分析結(jié)果：相互作用蛋白鑒定結(jié)果，western blot鑒定結(jié)果；完整實(shí)驗(yàn)報(bào)告(包括詳細(xì)實(shí)驗(yàn)步驟及免疫共沉淀結(jié)果相關(guān)的圖表) |
說(shuō)明 |
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